抗體(ti)及冷(leng)凍幹燥(zao)

抗體(ti)是(shi)壹類(lei)能與(yu)抗原(yuan)特異(yi)性結合的免(mian)疫(yi)球(qiu)蛋白(bai)。抗(kang)體(ti)按其(qi)反(fan)應形式(shi)分為(wei)凝(ning)集素(su)、沈(chen)降(jiang)素、抗毒素、溶(rong)解(jie)素、調(tiao)理素、中(zhong)和抗體(ti)、補體(ti)結合抗(kang)體(ti)等。抗體(ti)在(zai)醫(yi)療(liao)實踐中(zhong)應用廣(guang)泛。抗體(ti)的溶(rong)解(jie)方法是(shi)用移液器(qi)加(jia)0.1ml雙(shuang)蒸水到試(shi)管內(nei)，混勻，-20℃保存(cun)。怎樣分裝呢？抗(kang)體(ti)溶解(jie)後，將(jiang)其(qi)分裝成 5-10 支(zhi)（如(ru) 0.1ml 抗體(ti)， 20ulx5 支(zhi)或(huo) 10ulx10 支(zhi)）， -20℃保存(cun)，用壹支(zhi)取(qu)壹(yi)支(zhi)，避(bi)免(mian)反復凍溶。抗原(yuan)抗體(ti)凍幹保護劑機(ji)理(li)：甘油(you)、山梨(li)醇(chun)可以保持抗原(yuan)抗體(ti)表面的滋(zi)潤，使(shi)其(qi)不至於(yu)因(yin)失(shi)水而(er)失(shi)活(huo)。以血漿(jiang)為例(li)介紹壹(yi)下(xia)其(qi)制備及冷(leng)凍幹燥(zao)1.先將冰(bing)凍血漿(jiang)在(zai)37℃以下合並(bing)融(rong)化(hua)。2. 將血漿(jiang)溫(wen)度(du)降(jiang)至0℃，在(zai)攪拌(ban)的條件(jian)下(xia)，加(jia)-20℃95%的乙醇(chun)，使(shi)乙醇(chun)終濃(nong)度為(wei)20%，溫(wen)度(du)保(bao)持(chi)在(zai)-4.5~-5.0℃，產(chan)生(sheng)的沈(chen)澱含(han)有大多(duo)數種(zhong)類的免(mian)疫(yi)球(qiu)蛋白(bai)；3. 沈(chen)澱用10倍(bei)的冰(bing)水溶(rong)解(jie)，在(zai)攪拌(ban)條件(jian)下(xia)，加(jia)-20℃95%的乙醇(chun)，使(shi)乙醇(chun)終濃(nong)度為(wei)8%，溫(wen)度(du)保(bao)持(chi)在(zai)-1~-2℃，產(chan)生(sheng)沈(chen)澱；4.分離(li)出上清(qing)液，在(zai)攪拌(ban)條件(jian)下(xia)，加(jia)入(ru)-20℃95%的乙醇(chun)，使(shi)乙醇(chun)濃(nong)度到達15%，溫(wen)度(du)保(bao)持(chi)在(zai)-2~-3℃，分離(li)出沈(chen)澱；5. 將(jiang)沈(chen)澱懸浮(fu)在(zai)10倍(bei)冰水中(zhong)，用0.45μm濾芯過(guo)濾(lv)，濾(lv)液用S/D法滅活(huo)；6. 滅(mie)活(huo)後(hou)，100k超(chao)濾濃(nong)縮(suo)；7.選用層析柱，上柱層析吸附(fu)雜(za)蛋白(bai)，在(zai)峰收集(ji)，所(suo)得即為較(jiao)高純(chun)度(du)的IgM；8. 將(jiang)收(shou)集液超(chao)濾脫(tuo)醇(chun)濃(nong)縮(suo)，確(que)定計(ji)量制品(pin)體(ti)積，將(jiang)濃(nong)縮(suo)液配制，以符合規定的理(li)化(hua)指標，然後(hou)除菌過濾(lv)，分裝，半壓塞(sai)，入(ru)櫃(gui)凍幹.9. 凍幹結束後(hou)，真空(kong)壓塞(sai)，制品(pin)出櫃(gui)壓蓋(gai)，然(ran)後(hou)將(jiang)制品(pin)置(zhi)於(yu)沸水浴(yu)中(zhong)30分鐘(zhong)進(jin)行幹熱滅(mie)活(huo)；10. 對(dui)幹(gan)熱滅(mie)活(huo)後(hou)的制品(pin)進行(xing)檢(jian)驗(yan)，合格品於(yu)2~8℃儲存(cun)。