凍幹外(wai)泌體誘導膠原(yuan)化和抗(kang)衰(shuai)老(lao)及凍(dong)幹(gan)要點(dian)要點

凍(dong)幹(gan)外(wai)泌體誘導膠原(yuan)化和抗(kang)衰(shuai)老(lao)：皮膚紫外(wai)線損(sun)傷是(shi)皮膚老(lao)化過程(cheng)中紫外(wai)線損(sun)傷的(de)累(lei)積，是(shi)內源(yuan)性(xing)衰老(lao)與(yu)紫外(wai)線輻(fu)射相互(hu)作(zuo)用(yong)的(de)結果(guo)，具有組(zu)織(zhi)解(jie)體、碎(sui)裂(lie)和膠原(yuan)束分(fen)散(san)等(deng)特征。基質(zhi)金屬蛋(dan)白酶(mei) (MMP) 可(ke)特異性降(jiang)解(jie)幾乎所(suo)有細胞(bao)外(wai)基質(zhi) (ECM) 成分，並在皮膚光(guang)老(lao)化中(zhong)發(fa)揮重要(yao)作用(yong)。光(guang)老(lao)化會(hui)逐漸(jian)損(sun)害人(ren)真(zhen)皮成纖(xian)維(wei)細胞(bao) (HDF) 的(de)功能(neng)，後者(zhe)會在(zai)真(zhen)皮中產(chan)生膠原(yuan)蛋(dan)白(bai)和基質(zhi)金屬蛋(dan)白酶(mei)。誘導多能(neng)幹細胞(bao)來(lai)源(yuan)的(de)外(wai)泌體（iPSCs-Exo） 可(ke)以(yi)增加光(guang)老(lao)化 HDFs 中(zhong) I 型膠(jiao)原蛋(dan)白(bai)的(de)表達水(shui)平(ping)，降低 SA-β-Gal、MMP-1/3 的(de)表達水(shui)平(ping)，恢復衰老(lao) HDFs 中(zhong) I 型膠(jiao)原蛋(dan)白(bai)的(de)表達。外(wai)泌體通過冷凍(dong)幹燥技術(shu)，在(zai)低(di)溫(wen)低(di)壓下移除(chu)水(shui)分(fen)，從液(ye)態轉(zhuan)變為固態(tai)粉(fen)末(mo)，在(zai)長(chang)期(qi)儲(chu)存(cun)中保持(chi)其生物活(huo)性(xing)和結構完整(zheng)性(xing)。

外(wai)泌體凍(dong)幹(gan)時的(de)關(guan)鍵要點(dian)：1. 要(yao)制(zhi)備(bei)高純(chun)度、高濃度的外(wai)泌體溶(rong)液(ye)；2.選(xuan)擇(ze)凍幹保護(hu)劑時通常(chang)使(shi)用1%-5% (w/v) 的(de)海(hai)藻(zao)糖(tang)溶(rong)解(jie)在PBS或(huo)無(wu)酶(mei)水(shui)中(zhong)。優化配(pei)方(fang)需要(yao)通過實驗確(que)定(ding)3.  預凍終(zhong)點溫(wen)度必(bi)須(xu)低於樣(yang)品的(de)共(gong)晶點(dian)或(huo)玻璃化轉(zhuan)變溫(wen)度，確(que)保(bao)凍(dong)結。通常(chang)需要(yao)維(wei)持(chi)在-40°C以(yi)下數(shu)小時(shi)。4.外(wai)泌體品(pin)溫(wen)度與擱板溫(wen)度接近，且(qie)冷(leng)凝(ning)器(qi)捕(bu)獲(huo)的水(shui)分(fen)不再顯(xian)著(zhu)增(zeng)加時，表明壹次(ci)幹燥基本(ben)完成；5.外(wai)泌體的(de)凍(dong)幹後的制品(pin)的(de)殘(can)留水(shui)分(fen)是(shi)關(guan)鍵指(zhi)標(biao)，壹(yi)般(ban)需要控制在(zai)1%-3%之(zhi)間。水(shui)分(fen)過高會(hui)影響穩(wen)定(ding)性(xing)，過低可(ke)能導致(zhi)過度幹燥而失活；6. 密(mi)封(feng)後的凍幹(gan)粉(fen)應在(zai)-20°C或(huo)-80°C的(de)幹(gan)燥、避(bi)光(guang)環(huan)境(jing)中(zhong)長(chang)期(qi)保(bao)存(cun)。

具有成熟的(de)外(wai)泌體凍(dong)幹(gan)工藝技術(shu)，可(ke)提(ti)供上(shang)下遊的外(wai)泌體凍(dong)幹(gan)技術(shu)，包(bao)括(kuo)提供外(wai)泌體凍(dong)幹(gan)保護(hu)劑篩(shai)選(xuan)，凍(dong)幹工藝優化，凍(dong)幹放(fang)大(da)生產(chan)。