產品中(zhong)心
PRODUCTS CENTER外泌(mi)體差速超(chao)速離(li)心(xin)提(ti)純方法:
DUC 是(shi)最(zui)早(zao)和(he)最(zui)常(chang)報(bao)道的(de)外泌(mi)體分(fen)離策略。操(cao)作(zuo)步(bu)驟如下。該方(fang)法過程(cheng)簡單(dan),不(bu)引(yin)入其(qi)他(ta)標記(ji),適用於(yu)大劑(ji)量(liang)樣品分(fen)析。然(ran)而,鑒(jian)於細(xi)胞外液具有(you)高(gao)度異(yi)質(zhi)性,DUC 可(ke)導致(zhi)非(fei)理(li)想(xiang)的(de)外泌(mi)體聚(ju)集; 因此(ci),它可能不(bu)是(shi)壹(yi)種合(he)適的(de)外泌(mi)體純(chun)化(hua)方(fang)法,因為大小(xiao)相似的(de)不(bu)同囊(nang)泡(pao)和(he)蛋(dan)白(bai)質聚(ju)集體可以在 100,000 × g 下(xia)共(gong)同形(xing)成(cheng)。因此(ci),應(ying)進(jin)壹步(bu)純(chun)化(hua)使用該方(fang)法制備的(de)外泌(mi)體。此(ci)外,離心(xin)力(li)會導致(zhi)外泌(mi)體結(jie)構(gou)的(de)破(po)壞,進(jin)而影(ying)響(xiang)下(xia)遊實(shi)驗(yan),特(te)別是(shi)外泌(mi)體的(de)功能分(fen)析。
外泌(mi)體凍(dong)幹工藝開(kai)發與(yu)處方設(she)計:
1. 核(he)心目標: 保持(chi)外泌(mi)體完(wan)整(zheng)性(膜(mo)結(jie)構(gou)、RNA/蛋(dan)白(bai)質活(huo)性);提(ti)高(gao)凍(dong)幹後復(fu)溶性及(ji)長(chang)期(qi)穩定性。
2. 關(guan)鍵步驟與(yu)實(shi)驗(yan)設(she)計保(bao)護(hu)劑(ji)篩(shai)選(xuan):常用(yong)海藻(zao)糖(tang)、蔗(zhe)糖(tang)、甘露(lu)醇等(deng)非(fei)還(hai)原性糖(tang)類(lei),通(tong)過氫(qing)鍵穩定脂(zhi)質(zhi)雙層(ceng)結(jie)構(gou),減(jian)少(shao)冰(bing)晶(jing)損(sun)傷。 實(shi)驗(yan)方案(an):對比(bi)不(bu)同保護(hu)劑(ji)(如海(hai)藻糖濃(nong)度梯(ti)度)對外泌(mi)體粒(li)徑(jing)、Zeta電(dian)位、蛋(dan)白(bai)質含(han)量(liang)的(de)影響(xiang)。
凍(dong)幹曲線(xian)優化(hua): 分(fen)析指(zhi)標:水(shui)分(fen)殘(can)留量(liang)(<3%)、復溶時(shi)間(<1分鐘)、形(xing)態(納米流(liu)式檢測(ce),需要(yao)由用戶完(wan)成(cheng))。
外泌(mi)體凍(dong)幹可提(ti)供(gong)如(ru)下(xia)服(fu)務:
1. 提(ti)供(gong)外泌(mi)體凍(dong)幹配方(fang)開(kai)發(fa)。
2. 提(ti)供(gong)外泌(mi)體凍(dong)幹工藝曲(qu)線開(kai)發。
3. 提(ti)供(gong)外泌(mi)體凍(dong)幹生產(chan)放(fang)大工藝開(kai)發。
4. 提(ti)供(gong)外泌(mi)體上下(xia)遊凍(dong)幹設(she)備開發(fa)。