熒光PCR凍幹-DTT

二(er)硫(liu)蘇(su)糖(tang)醇（簡(jian)稱為DTT）是(shi)壹種(zhong)小分(fen)子(zi)有機(ji)還(hai)原(yuan)劑(ji)，其(qi)還(hai)原(yuan)狀態(tai)下為線(xian)性分子(zi)。DTT有(you)什麽特點？怎(zen)麽保存呢(ne)？DTT是(shi)壹種(zhong)常(chang)用(yong)還(hai)原(yuan)劑(ji)，有(you)抗氧化作(zuo)用(yong)，進口分(fen)裝。DTT和巰基乙(yi)醇相比， DTT的(de)刺(ci)激性氣(qi)味(wei)要小(xiao)很(hen)多，毒(du)性也比(bi)巰基乙(yi)醇低(di)很(hen)多。另(ling)外DTT比巰基乙(yi)醇的(de)濃(nong)度(du)低(di)7倍時，兩(liang)者(zhe)效果相近(jin)。DTT壹般保存(cun)條件為-20℃保(bao)存(cun)。1M DTT溶(rong)液(ye)可以在-20℃保(bao)存(cun)2年以(yi)上。由(you)於(yu)容(rong)易被(bei)空氣(qi)氧化， DTT的(de)穩(wen)定(ding)性較差(cha);但冷(leng)凍保存(cun)或在惰(duo)性氣(qi)體(ti)中處理(li)能夠(gou)延(yan)長(chang)它(ta)的(de)使(shi)用壽(shou)命(ming)。DTT作(zuo)為PCR的(de)添加(jia)劑與(yu)DMSO、甜(tian)菜(cai)堿、BSA混合(he)配(pei)制成的(de)復合型(xing)添加(jia)劑，按(an)照(zhao)壹定(ding)比例配(pei)比(bi)，能獲(huo)得(de)PCR擴增(zeng)特異性和很(hen)高的(de)PCR擴增(zeng)產(chan)量(liang)。PCR的(de)擴增(zeng)反(fan)應(ying)並不(bu)是(shi)可(ke)以無窮(qiong)地(di)進行(xing)下去的(de)，經(jing)過壹定(ding)的(de)循環周期後(hou)需擴增(zeng)的(de)片(pian)段(duan)不(bu)再按(an)指(zhi)數(shu)增多而逐漸進入(ru)平(ping)坡(po)；進(jin)入(ru)平(ping)坡(po)的(de)循環次(ci)數(shu)，取決於(yu)起始(shi)時(shi)存在的(de)模(mo)板(ban)拷貝數(shu)以及合(he)成(cheng)的(de)DNA總(zong)量。所(suo)謂平(ping)坡(po)就(jiu)是(shi)批(pi)PCR循環的(de)後(hou)期，合(he)成產(chan)物(wu)達0.3～1pmol時(shi)，由(you)於(yu)產(chan)物(wu)的(de)堆(dui)積(ji)，使原(yuan)來以指(zhi)數(shu)增加的(de)速(su)率(lv)變成(cheng)平(ping)坦(tan)的(de)曲(qu)線(xian)。

試(shi)劑(ji)凍幹機(ji)Pilot3-6T應用示例（熒(ying)光PCR凍幹）：

1. 探(tan)針(zhen)、底(di)物(wu)、引物(wu)原(yuan)料(liao)要求(qiu)確定(ding)。
2. 凍幹溶(rong)液(ye)配方開(kai)發，采用正(zheng)交(jiao)法(fa)或響應(ying)曲面(mian)法(fa)進行(xing)輔(fu)料篩(shai)選。
3. 選(xuan)擇(ze)適合的(de)包(bao)材和(he)模具(ju)。
4. 設(she)計(ji)凍幹曲線(xian)配合(he)輔(fu)料篩(shai)選。
5. 確(que)定(ding)配方(fang)及工(gong)藝(yi)。
6. 穩(wen)定(ding)性測(ce)試。
7. 根(gen)據穩(wen)定(ding)性測(ce)試結(jie)果修(xiu)正(zheng)工(gong)藝(yi)或配(pei)方(fang)。
8. 整(zheng)個(ge)環節(jie)註意環境(jing)、設(she)備(bei)、人(ren)員的(de)結(jie)合。