熒(ying)光(guang)PCR實驗的關鍵(jian)步驟(zhou)

熒(ying)光(guang)定量(liang)PCR實驗時(shi)所需(xu)的耗材(cai)有八(ba)連(lian)管(guan)，光(guang)學級八(ba)連(lian)管(guan)蓋(gai)子(zi)，光(guang)學級96孔(kong)板封(feng)膜，96孔板等(deng)。熒(ying)光(guang)定量(liang)PCR實驗過(guo)程(cheng)分為RAN的提取，反轉錄, 熒(ying)光(guang)定量(liang)PCR反(fan)應(ying),  數(shu)據(ju)分析(xi)。做(zuo)熒(ying)光(guang)定量(liang)PCR實驗有(you)幾個關鍵(jian)步驟(zhou)需(xu)要(yao)註(zhu)意(yi)1.應(ying)有(you)合(he)適(shi)數(shu)目的生物學(xue)重(zhong)復(fu)及正確的對(dui)照樣(yang)品(pin)設(she)置(zhi)2.樣(yang)品的獲得(de)應按(an)照實驗流程(cheng)中對(dui)采樣(yang)，處理和(he)保(bao)存的要求(qiu)及(ji)確保重(zhong)復(fu)性並減小(xiao)重(zhong)復(fu)樣品間(jian)的標準(zhun)偏差(cha)。3對(dui)RAN的純度(du)和(he)完(wan)整性進(jin)行質(zhi)量(liang)控(kong)制(zhi)。4.將(jiang)總(zong)RAN反(fan)轉錄成cDNA的反轉錄反應。5.試驗(yan)中正確的引物設(she)計，引(yin)物退(tui)火溫(wen)度(du)確定，基(ji)因(yin)擴增效(xiao)率(lv)摸(mo)索。6.實驗數(shu)據(ju)分析(xi)中內參(can)基(ji)因(yin)選擇(ze)和統計方(fang)法計(ji)算(suan)。在(zai)做(zuo)熒(ying)光(guang)定量(liang)PCR實驗過(guo)程(cheng)中凍(dong)幹(gan)工(gong)藝(yi)優化(hua)也起(qi)著(zhe)重(zhong)要作(zuo)用。需(xu)要(yao)選(xuan)擇(ze)適(shi)合(he)的凍(dong)幹(gan)機(ji)，如Pilot10-15EP解(jie)決用戶(hu)對(dui)凍(dong)幹(gan)曲(qu)線不(bu)熟練(lian)的問(wen)題,縮短(duan)研(yan)發(fa)、小(xiao)試周(zhou)期(qi), 提高凍(dong)幹(gan)產(chan)品的壹(yi)致(zhi)性(xing),解決用戶(hu)在(zai)應用當中的技術問(wen)題。